Determinação de aminoácidos protéicos em rações, componentes de rações e matérias-primas de rações

INTRODUÇÃO

O método é usado para a determinação da fração de massa de aminoácidos totais: arginina, lisina, tirosina, fenilalanina, histidina, leucina e iso-leucina (como uma soma), metionina, valina, prolina, alanina, glicina, cistina, triptofano e ácidos aspártico e glutâmico em rações, rações compostas, forragens, pré-misturas e todos os tipos de matérias-primas de rações por eletroforese capilar.

O método destina-se à determinação do teor total de aminoácidos numa amostra, por exemplo, a soma das formas livres e encadernadas. Devido ao estágio de hidrólise do tratamento da amostra, o teor de ácido aspártico e ácido glutâmico é a soma do teor de ácido e seu teor de amida (asparagina e glutamina, respectivamente). O teor de cistina representa a soma de cistina e cisteína que são oxidadas em ácido cisteico antes da análise. A leucina e a iso-leucina formam um pico não resolvido, representando assim seu teor resumido.

O método não distingue entre os sais de aminoácidos, nem diferencia entre as formas D e L de aminoácidos. Não é válido para a determinação de análogos de hidroxi de aminoácidos. Para a determinação do análogo hidroxi metionina (HMTBa) em aditivos para forragem, utilizar o método 04 04-83-2014 (série Lumex Instruments, Nº de pedido 0300001888).

MÉTODO DE MEDIÇÃO

A determinação dos aminoácidos nas amostras é feita após a hidrólise alcalina preliminar para o triptofano ou após a hidrólise ácida para todos os outros aminoácidos. Aminoácidos livres são transformados em derivados de fenilisotiocianato (derivados de PITC) e suas formas iônicas são determinadas por eletroforese capilar de zona com detecção direta de UV no comprimento de onda de 254 nm. O triptofano é quantificado sem derivatização por eletroforese capilar de zona com detecção direta de UV no comprimento de onda de 219 nm.